RWPE-1 人正常前列腺上皮細胞

產品基本信息

產品編號：KMCC-001-0066

細胞名稱：RWPE-1 人正常前列腺上皮細胞

英文名稱：Human Normal Prostate Epithelial Cells

別稱：RWPE1，RWPE 1

種屬來源：人

組織來源：前列腺正常細胞

細胞形態：上皮細胞樣

生長特性：貼壁生長

培養基：K-SFM + 0.05 mg/ml BPE + 5 ng/ml EGF+ 1% PS（a. 細胞在無血清培養體系中培養，其貼壁能力較弱，建議傳代后靜置24小時再進行后續操作。b. 細胞密度建議保持在4萬~ 7萬cells/cm2，接種密度建議在2萬~4萬活細胞/cm2。c. 使用0.05%胰酶消化細胞。同時由于K-sfm為無血清培養液無法終止胰酶消化，所以消化完成后要通過添加2%FBS（用D-PBS稀釋）或等體積的0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化并離心去除胰酶，再進行后續操作）

生長條件：氣相：95%空氣、5%二氧化碳；溫度：37℃；濕度：70~80%

傳代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

凍存條件：采用細胞凍存液，梯度降溫，液氮儲存

細胞用途：僅供研究之用

一位54歲白人男性的正常前列腺組織切片的周圍區域的上皮細胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒18（HPV-18）進行轉化，建立了RWPE-1。據報道，RWPE-1細胞在三維Matrigel培養時，在雄激素刺激下，形成腺胞（acini）并向培養基中分泌PSA。當與Matrigel或基質細胞混合注射雄性裸鼠時，RWPE-1細胞也能形成腺胞并產生PSA。來源于RWPE-1的細胞用Kirstin鼠肉瘤病毒（Ki-MuSV）轉染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-2細胞和 RWPE2-W99細胞。另外，用MNU處理RWPE-1，建立了一系列模擬前列腺癌進程中不同時期的成瘤細胞株。它們分別是WPE1-NA22, WPE1-NB14, WPE1-NB11和 WPE1-NB26細胞。據報道，RWPE-1細胞經過檢測后發現乙肝病毒、丙肝病毒和人免疫缺陷病毒都呈陰性。PCR證實該細胞系HPV病毒DNA序列呈陽性。每個批次均通過本庫支原體檢測，結果陰性。在我庫通過STR鑒定，數據上94%吻合。STR結果如下：D5S818: 12,15；D13S317: 8,14；D7S820: 10,11；D16S539: 9,11；vWA: 18；THO1: 8,9.3；Amelogenin: X,Y；TPOX: 8,11；CSF1PO: 13

產品編號：KMCC-001-0056

細胞名稱：T84 人結腸腺癌肺轉移細胞

英文名稱：Human colon adenocarcinoma lung metastasis cells

別稱：T-84，T 84

種屬來源：人

組織來源：結直腸癌 取材轉移灶： 肺

細胞形態：上皮細胞，多角形

生長特性：貼壁生長

培養基：DMEM/F12 培養基＋5% FBS ＋1% P/S（生長時，這株細胞應維持高密度生長，至少1/4滿）

生長條件：氣相：95%空氣、5%二氧化碳；溫度：37℃；濕度：70~80%

傳代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

凍存條件：細胞凍存液：95% *培養液 + 5% DMSO，梯度降溫，液氮儲存

細胞用途：僅供研究之用

產品編號：KMCC-001-0053

細胞名稱：RD 人橫紋肌肉瘤細胞

英文名稱：Human Rhabdomyosarcoma Cells

別稱： R D，RD-2，RD 2，130T，130-T，130 T，TE-32，TE 32，TE32，TE 32.T，Te 32.T，人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞

種屬來源：人

組織來源：肌肉，橫紋肌肉瘤

細胞形態：紡錘形和大的多核細胞

生長特性：貼壁生長

培養基：89% DMEM 培養基 + 10% FBS + 1%雙抗

生長條件：氣相：95%空氣、5%二氧化碳；溫度：37℃；濕度：70~80%

傳代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

凍存條件：采用細胞凍存液，梯度降溫，液氮儲存

細胞用途：僅供研究之用

細胞培養操作

1. 凍存細胞的復蘇

1.1 在超凈臺中取配好的*培養液5ml到15ml離心管中放至室溫備用。

1.2 快速將干冰或液氮保存的細胞株，放入37℃的水浴鍋后不停晃動凍存管，使其解凍并達到37℃，此過程盡量保持在3分鐘內完成。（備注：此處注意，管身或管內的液氮揮發完后才可放入，否則有炸裂風險）

1.3 將化凍的細胞液快速轉移至上述準備好培養基中，1000rpm 、4min離心收集細胞并傳代，傳代方法如下：

2. 細胞傳代處理

2.1 待長滿瓶底至80%以上時，貼壁細胞棄掉培養瓶中的培養基，用1X PBS洗兩遍。

2.2 加1mL 0.25%的胰酶溶液，置于37℃培養箱中消化2-3分鐘，直至看到有細胞從瓶底上脫落分離。

2.3 加入2mL*培養基終止消化，輕輕吹打將所有細胞從培養瓶表面吹落并轉移到離心管中，1000rpm 、4min離心收集細胞。

2.4 收集好的細胞用*培養基重懸，并輕輕吹打懸浮，若無特別說明，就按1:2~1:3的比例鋪新的培養瓶，放進培養箱繼續培養（每個細胞培養條件不同，大部分細胞5%CO2、37℃恒溫培養）。

3.細胞凍存處理

3.1 收集方法同上，

3.2 收集好的細胞用細胞凍存液（若無特殊說明，一般細胞凍存液成分為：10%血清+80%培養基+10%DMSO）懸浮，并按4℃、1h，-20℃、30min，-80℃過夜，液氮長期的溫度梯度進行保存。

細胞功能研究相關檢測：

2D細胞培養和觀察

3D細胞培養和觀察

原代細胞分離/培養/鑒定

細胞增殖/毒性檢測（MTT 法/CCK8 法）

細胞凋亡檢測（AnnexinV FITC/PI雙染流式法/Tunel法）

細胞周期檢測（PI染料標記流式法）

細胞遷移/侵襲檢測（劃痕法/Transwell法）

流式細胞分選（流式細胞術）

細胞免疫熒光檢測

小管形成實驗（tube formation，體外血管生成實驗）

細胞克隆形成實驗

細胞外泌體分離與鑒定

慢病毒包裝及穩轉株篩選

電生理檢測

個性化細胞實驗（藥物篩選等）

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